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    實時熒光定量PCR標準品稀釋法

    發布時間:2020-07-19   點擊次數:759次

    實時熒光定量PCR是在常規PCR基礎上加入熒光標記探針或相應的熒光染料,利用熒光信號積累對PCR反應的過程,進行實時監控實現起始模板的準確定量。實時熒光定量PCR標準品梯度稀釋方法依次是選擇目標、提取/PCR、純化、測試濃度、調整濃度、梯度稀釋。一般CT值在18-30之間,覆蓋全部樣品濃度區間。和大家在分享一下10倍連續梯度稀釋方法:1V原液(標準品為i+9V稀釋緩沖液,得到標準品為ii。1V標準品ii+9V稀釋緩沖液,得到標準品為iii, 1V標準品iii+9V稀釋緩沖液,得到標準品為iv, 1V標準品iv+9V稀釋緩沖液v,切不可用標準品i分別加不同體積的稀釋緩沖液直接得到標準品ii、iii、iv、v,標準品要復管做測試,復管次數要遵循統計學要求。熒光PCR凍干時,制品溶液厚度不宜過厚。一般應為10-15mm,制品過厚的情形類似于濃度過高時的情況,不僅干燥的時間更長,塌陷、結塊。凍干機Pilot3-6T醫療應用涉及產品有:熒光PCR、免疫微球、化學發光、基因芯片、量子點、ELISA、膠體金、POCT、IVD校準品質控品校準品、內毒素檢測試劑、血清、白蛋白、干細胞及相應提取物等。

    型號

    Pilot3-6T

    Pilot5-8T

    Pilot7-12T

    Pilot10-15T

    凍干面積

    0.42

    0.56

    0.84

    1.05

    22西林瓶裝量(20ML

    ≥900

    ≥1170

    ≥1500

    ≥2100

    16西林瓶裝量(5ML

    ≥1700

    ≥2210

    ≥3100

    ≥4100

    冷阱溫度(空載)

    -85

    真空度(空載)

    ≤1Pa

    板層溫度(空載)

    -55

    板層制冷方式

    硅油循環

    板層數量

    3+1

    4+1

    4+1

    5+1

    板層尺寸(mm

    350*400

    350*400

    350*600

    350*600

    捕水能力

    6L

    8L

    12L

    10L

    凍干效率

    3L/24H

    5L/24H

    7L/24H

    10L/24H

    板層間距

    100mm

    80mm

    90mm

    100mm

    穿墻隔離

    凍干曲線擬合度

    100%

    100%

    100%

    100%

    晶型控制

    蒸汽分壓控制

    升華結束判定

    凍干終點測試

    壓塞

    液壓

    整機尺寸 (約)

    W860*D1400*H1800

    W860*D1400*H1800

    W860*D1700*H1900

    W860*D1700*H1900

     

     

     

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